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RNase抑制劑(Murine RNase Inhibitor)

產(chǎn)品參數(shù)

產(chǎn)品參數(shù)

名稱 規(guī)格 貨號
RNase抑制劑
(Murine RNase Inhibitor)
50μL M111U1
100μL
產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品介紹

Murine RNase Inhibitor是在大腸桿菌中表達純化的重組鼠源RNase抑制劑,它以1:1的非共價結(jié)合方式特異性抑制RNase(A、B和C),從而保護RNA完整度不被降解。本產(chǎn)品可與各種商業(yè)化Reverse Transcriptase和DNA Polymerase兼容,可用于后續(xù)RT-PCR試驗等。Murine RNase Inhibitor不含人源蛋白中兩個對氧化非常敏感的半胱氨酸,相比人源RNase inhibitor具有更高的抗氧化活性,更加適合于高DTT敏感性試驗(如qPCR)。

活性定義

抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。 RNase A的活性是通過抑制Cyclic 2', 3'-CMP水解生成3'-CMP定量確定的。

產(chǎn)品應(yīng)用

1. RT-PCR。
2. 在體外轉(zhuǎn)錄/翻譯(如病毒體外復(fù)制體系)中對RNA進行保護。
3. RNA完整性保護試驗。

運輸與保存

-20°C保存,冷凍運輸。

注意事項

1. 本產(chǎn)品的活性溫度在42℃表現(xiàn)最大活性,50℃以上失活。
2. 本產(chǎn)品抑制RNase活性的pH值范圍較廣,在pH 7.0-8.0時表現(xiàn)最大活性。
3. 本產(chǎn)品在使用前避免劇烈震蕩,輕彈混勻較好。
4. 本產(chǎn)品不抑制RNase H及RNase T1活性。

試驗操作

  • 在RNase-free離心管中配制以下混合液;
    組分 體積(μL)
    RNase-free ddH2O Up to 20
    5×RT Buffer 4
    Oligo(dT)18(20 μM) 1
    dNTP Mix(10 mM each) 1
    Murine RNase Inhibitor(40 U/μL) 1
    Reverse Transcriptase(200 U/μL) 1
    模板RNA 10pg-2.5μg
  • 輕輕混勻,瞬時離心;
  • 42℃ 45 min,70℃ 15 min;
  • 產(chǎn)物于-20℃保存。
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