血清淀粉樣蛋白A（SAA）的檢測(cè)方法

放射性免疫檢測(cè)法（RIA）

RIA有很高的檢測(cè)靈敏度，但由于標(biāo)記物具有放射性危害，標(biāo)記物穩(wěn)定性差，廢棄物難以處理等缺點(diǎn)，已逐漸退出臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域。

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）

ELISA法采用辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)或堿性磷酸酶標(biāo)記抗體，并催化底物產(chǎn)生顏色變化，具有操作簡單，試劑穩(wěn)定期長的特點(diǎn)，但ELISA法的檢測(cè)靈敏度較低，線性范圍窄，目前主要應(yīng)用于傳染性疾病篩查等對(duì)檢測(cè)靈敏度要求較低的項(xiàng)目。

實(shí)驗(yàn)原理

用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗SAA抗體的微孔中依次加入SAA抗原標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗SAA抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMD顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色。并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的SAA蛋白呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。

乳膠免疫比濁法

乳膠免疫比濁法是利用抗原抗體反應(yīng)原理測(cè)定血清中SAA蛋白的含量，此方法無法兼顧靈敏度和線性。

透射比濁法：免疫透射比濁法檢測(cè)SAA是沿光源的光路方向測(cè)量透射光強(qiáng)度和被檢測(cè)溶液微粒濃度關(guān)系。

散射比濁法：不同于透射比濁法，散射濁度法是檢測(cè)激光通過溶液時(shí)光線被粒子顆粒折射、偏轉(zhuǎn)的情況確定抗原抗體復(fù)合物顆粒大小和濃度。一些特定蛋白分析儀具有抗原過剩自動(dòng)檢測(cè)功能，當(dāng)樣本中出現(xiàn)SAA過剩時(shí)，特定蛋白分析儀能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)稀釋再檢測(cè)，防止鉤狀效應(yīng)影響檢測(cè)結(jié)果。

膠體金斑點(diǎn)滲濾法

膠體金斑點(diǎn)滲濾法是應(yīng)用微孔濾膜作載體，先將抗原/抗體點(diǎn)于膜上，封閉后加待檢樣本，洗滌后用膠體金標(biāo)記的SAA抗體檢測(cè)相應(yīng)的抗原/抗體。

免疫層析法

免疫層析法是采用膠體金、熒光微球、吖啶酯等作為標(biāo)記物，以免疫層析方法，配合使用免疫分析儀，實(shí)現(xiàn)檢測(cè)人血清、血漿和全血樣本中SAA蛋白的含量。目前，市場上常見的免疫層析法有：膠體金定量免疫層析法，熒光定量免疫層析法，化學(xué)發(fā)光免疫分析法等。

參考文獻(xiàn)

[1] 黃建央, 沈敏敏, 劉東海. 血清淀粉樣蛋白A兩種檢測(cè)方法相關(guān)性的比對(duì)及相關(guān)疾病樣本檢測(cè)結(jié)果分析[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué), 2014, 29(5):574-575.
[2] 楊紅玲, 鄭磊, 周才, et al. 膠體金滲濾法檢測(cè)血清淀粉樣蛋白A方法評(píng)價(jià)及其在兒童感染性疾病診斷中的應(yīng)用[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2014, 37(11):836-841.

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